如何鑒定酶標(biāo)儀的性能，看完這一篇就明白了

近年來(lái)，酶標(biāo)儀在臨床實(shí)驗(yàn)室中的應(yīng)用越來(lái)越普及，使得酶免疫分析法（EIA）的自動(dòng)化程度及性愈來(lái)愈高，尤其是近幾年，進(jìn)口的、國(guó)產(chǎn)的單、多通道全自動(dòng)酶標(biāo)儀的種類(lèi)及型號(hào)發(fā)展非常迅猛，是臨床實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化程度繼生化分析儀、血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀、血凝儀等之后的又一次更新和提高。然而，國(guó)內(nèi)外有關(guān)酶標(biāo)儀性能系統(tǒng)評(píng)價(jià)的方法甚少，有的評(píng)價(jià)指標(biāo)簡(jiǎn)單且不全面，有的對(duì)其性能評(píng)價(jià)所采用的方法不盡一致，導(dǎo)致不同儀器之間、廠家與用戶之間、用戶與用戶之間的評(píng)價(jià)指標(biāo)缺乏可比性，這是由于酶標(biāo)儀在制造工藝（多通道檢測(cè)器）、測(cè)定原理（垂直光路光度測(cè)定法）與其它水平光路光度測(cè)定的儀器（721分光光度計(jì)）之間存在著很大的差別。針對(duì)這個(gè)狀況，我們初步建立以下的性能鑒定方法，希望對(duì)大家有所幫助。

測(cè)定的吸光度范圍

通常，酶標(biāo)儀的吸光度測(cè)定范圍在0——2.5之間即可以滿足ELISA的測(cè)定要求。早期的酶標(biāo)儀可測(cè)定的吸光度一般在0——2.5之間，但現(xiàn)在基本上都做了拓寬，可達(dá)到3.5以上，并且能保持很好的精密度與線性。因此，對(duì)于酶標(biāo)儀的吸光度范圍不必去刻意追求大的吸光度范圍，主要要看在一定的吸光度范圍內(nèi)的線性和精密度如何。

光學(xué)系統(tǒng)

酶標(biāo)儀的光學(xué)系統(tǒng)采用的是垂直光路多通道(通常為8或12通道，亦有單通道)檢測(cè)，一般為硅光管或光導(dǎo)纖維，除測(cè)定通道外，有的酶標(biāo)儀還有一個(gè)參比通道，每次測(cè)定可進(jìn)行自我校準(zhǔn)。酶標(biāo)儀的光學(xué)系統(tǒng)功能如何，均可通過(guò)酶標(biāo)儀測(cè)定的吸光度范圍、線性度、精密度和準(zhǔn)確度等體現(xiàn)出來(lái)。光學(xué)系統(tǒng)好的話，則上述指標(biāo)也應(yīng)較佳。測(cè)定的精密度與測(cè)定通道之間的均一性有直接關(guān)系。單通道可避免因通道不同所致的差異。

檢測(cè)速度

酶標(biāo)儀的檢測(cè)速度是指其完成比色測(cè)定所需要的時(shí)間。檢測(cè)速度快，有利于提高檢測(cè)的精密度，即避免由于測(cè)定過(guò)程中，因測(cè)定時(shí)間不同所致的各微孔間吸光度間的差異。目前市場(chǎng)上常見(jiàn)的酶標(biāo)儀檢測(cè)速度都非?？?，通常在數(shù)秒鐘內(nèi)。

震板功能

酶標(biāo)儀的震板功能是指酶標(biāo)儀在對(duì)ELISA板孔進(jìn)行比色測(cè)定前對(duì)其進(jìn)行振蕩混勻，使板孔內(nèi)顏色均一。目前市場(chǎng)上常見(jiàn)的酶標(biāo)儀均有震板功能，所不同的是震板方式，有的可按上下、左右或旋轉(zhuǎn)等方式及振蕩幅度等任意調(diào)節(jié)；有的則較為固定。使用有震板功能的酶標(biāo)儀，在進(jìn)行ELISA測(cè)定顯色反應(yīng)完成加入終止劑后，可不必振蕩混勻，直接放人酶標(biāo)儀上測(cè)定即可。

溫育功能

溫育功能是指酶標(biāo)儀本身能按要求自動(dòng)地控制儀器內(nèi)部的溫度，使得ELISA測(cè)定中微孔板條的溫育過(guò)程可在儀器內(nèi)部完成，而無(wú)需再外配溫箱。目前，只有少部分酶標(biāo)儀具有此種功能，溫育功能只是酶標(biāo)儀的一個(gè)附加功能，是否具有并不能說(shuō)明酶標(biāo)儀檔次的高低及儀器的優(yōu)劣。作為實(shí)驗(yàn)室是否選擇，則可根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)室的條件及需要來(lái)決定。

軟件功能

軟件功能是指酶標(biāo)儀所具有的對(duì)ELISA定性和定量測(cè)定及其他測(cè)定方式如酶標(biāo)動(dòng)力學(xué)、紫外和凝集等數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析并報(bào)告結(jié)果的功能。軟件功能是中酶標(biāo)儀的一個(gè)非常重要的功能。如果硬件方面區(qū)別不大，則軟件就成為判定酶標(biāo)儀優(yōu)劣的惟一指標(biāo)。對(duì)于用戶來(lái)說(shuō)，好的軟件功能，對(duì)實(shí)際工作會(huì)有較大的幫助。ELISA定性測(cè)定，酶標(biāo)儀如具有陽(yáng)性判斷值(cut-off)及其測(cè)定“灰區(qū)”(即指測(cè)定吸光度處于cut—off周?chē)囊欢▍^(qū)域，此區(qū)域內(nèi)結(jié)果應(yīng)為“可疑”)的統(tǒng)計(jì)計(jì)算功能，不但方便了實(shí)驗(yàn)室工作人員，而且在某些特定的情況下，有很高的實(shí)用價(jià)值。因此，如目的是定量測(cè)定，則在酶標(biāo)儀的軟件功能中，要有這種曲線回歸方程計(jì)算分析功能。其他諸如連點(diǎn)、直線等回歸計(jì)算，則可根據(jù)酶標(biāo)儀的應(yīng)用目的而定，如兼用于微量生化測(cè)定，則此類(lèi)回歸計(jì)算就很有必要。

此外，酶標(biāo)儀兼做酶標(biāo)動(dòng)力學(xué)、凝集反應(yīng)測(cè)定所需的軟件是否應(yīng)具備，當(dāng)然也應(yīng)根據(jù)使用目的而定。由于此類(lèi)軟件一般都較為昂貴，酶標(biāo)儀常另外單獨(dú)按需配備，如果不是實(shí)驗(yàn)室特殊需要，就不必強(qiáng)求這種軟件功能。

語(yǔ)言界面

通常進(jìn)口的中酶標(biāo)儀人機(jī)對(duì)話多采用英文。這對(duì)于某些基層實(shí)驗(yàn)室可能會(huì)存在語(yǔ)言方面的困難，從而難以大限度地發(fā)揮酶標(biāo)儀的作用。為解決這方面的問(wèn)題，已有一些酶標(biāo)儀采用了中文界面。這樣就大大方便了廣大基層實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員的使用。

綜上所述，盡管酶標(biāo)儀的發(fā)展極為快速，種類(lèi)繁多，功能也不斷加強(qiáng)，但其根本的功用是不變的，即比色測(cè)定。大凡比色測(cè)定，其基本要求就是在一定吸光度范圍內(nèi)要有好的測(cè)定準(zhǔn)確性、線性和精密性。同樣的吸光度范圍，測(cè)定的準(zhǔn)確性、線性和精密性越好則酶標(biāo)儀亦越佳。

而且，由于用于酶標(biāo)儀比色測(cè)定的為多孔(通常為96孔)微孔板條，為保證測(cè)定的孔間重復(fù)性，則測(cè)定速度也是一個(gè)較重要的性能指標(biāo)。至于其他如震板、溫育及有關(guān)的軟件功能，則是選配功能，不影響酶標(biāo)儀其他的使用性能。

在對(duì)酶標(biāo)儀進(jìn)行評(píng)估時(shí)，還應(yīng)對(duì)儀器的自動(dòng)化程度及售后服務(wù)有一個(gè)比較全面的了解。自動(dòng)化程度如儀器的分辨率（一般為0.001A）、報(bào)告的方式（通常提供4——6種以上的格式）、可提供濾光片的大數(shù)目（有些廠家可根據(jù)用戶要求訂做）、是否提供用戶自編程序及外接微機(jī)的功能和軟件等等。

售后服務(wù)也是儀器使用順利與否的根本保證，用戶應(yīng)當(dāng)與信譽(yù)較好、服務(wù)周到、維修方便的代理商進(jìn)行恰談，以免儀器一旦出現(xiàn)故障，而不致于影響工作或使儀器處于癱瘓狀態(tài)不能發(fā)揮應(yīng)有的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。

另外需要強(qiáng)調(diào)的是：由于酶標(biāo)儀的種類(lèi)、型號(hào)繁多，每個(gè)儀器的測(cè)量原理也不盡相同，為了保證不同儀器之間測(cè)定結(jié)果的一致性，我們認(rèn)為在測(cè)定時(shí)應(yīng)采用雙波長(zhǎng)法，而且必須采用雙波長(zhǎng)，這樣既能消除干擾組份和干擾因素的影響，又能避免因儀器測(cè)量原理不同而造成儀器之間結(jié)果的不一一致性。